大鼠CD40配體 （ELISA）試劑盒

Elisa 生物檢測是一種實驗性診斷方法，具有靈敏度高、特異性強、重現(xiàn)性好等特點。 因其試劑穩(wěn)定、易于儲存、操作簡便、結果判斷客觀等特點，被廣泛應用于免疫學檢測的各個領域。 ELISA檢測試劑盒適用于人血清或血漿中抗人戊型肝炎（HEV）病毒IgM抗體ELISA檢測的體外定性檢測。

中文名稱ELISA試劑盒

外文名ELISA試劑盒

發(fā)表于 60 年代和 70 年代

特點：試劑穩(wěn)定、易儲存、易操作。

操作方法

雙抗體夾心法

1. 包被：以 0.05 MPH 稀釋抗體至蛋白質含量為 1-10 μg/ml。 9.含氧碳酸鹽涂層緩沖液。在 4°C 下將 0.1 ml 添加到每個聚苯乙烯板的反應孔中過夜。次日，棄孔中溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，每次3分鐘。 （以下也稱為清掃）。

2、加樣：向上述包被好的反應液中加入0.1ml的特定稀釋待測樣品，37℃孵育1小時。然后洗。 （同時創(chuàng)建空白孔、陰性對孔和陽性對照孔）。

3. 酶標抗體的加入：每個反應孔中加入新鮮稀釋的酶標抗體（滴定后稀釋）0.1ml。在 37°C 下孵育 0.5-1 小時并洗滌。

4、加入底物溶液顯色：在每個反應孔中加入0.1ml臨時配制的TMB底物溶液，37℃孵育10-30分鐘。

5. 反應結束：向每個反應孔中加入 0.05 ml 2M 硫酸。

6、結果的判斷：在白色背景上可以用肉眼直接觀察結果。反應孔越深，陽性反應越強，陰性反應無色或非常淺。表示“-"符號。您還可以測量 OD 值。用ELISA檢測器在450nm（ABTS顯色時為410nm），用空白對照孔調零，如果大于OD值的2.1倍，測量各孔的OD值。的陰性對照為陽性。

間接法

1. 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10 μg/ml，每孔加入0.1 ml，4℃過夜；

2.次日洗3次；

3、在上述反應孔中加入0.1ml稀釋的待測樣品（未知抗體），37℃孵育1小時，洗滌；

4.（同時進行空白、陰性和陽性孔對照）反應孔中加入新鮮稀釋的酶標二抗0.1mL；

5. 37°C孵育35-60分鐘，洗滌；

6.' 最后用 DDW 洗滌。

其余步驟同“Double Antibody Sandwich Methods"的4、5、6。

可概括四個方面：

1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

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